明日就是這炎夏中的節氣大暑了,是一年中氣溫、*熱的時期,還是要提醒朋友們注意elisa試劑盒的溫度保溫,今天上海恒遠為朋友們歸納出ELISA經驗總結(包被)。 大致步驟為:選擇合適的板條→是包被液的選擇→是包被濃度的確定。
包被用抗原或抗體的濃度,包被的溫度和時間,包被液的pH等應根據試驗的特點和材料的性質而選定。抗體和蛋白質抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液,也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。 通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置一個晚上,37℃中保溫2小時被認為具有同等的包被效果。包被的*適當濃度隨載體和包被物的性質可有很大的變化,每批材料需通過實驗與酶結合物的濃度協調選定。一般蛋白質的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml。
抗原的包被要根據具體情況而定,比如有的抗原,只要加入抗原包被液后,4c放置一個晚上就可以。剛開始做一種抗原或抗體的ELISA時先做幾個梯度,以確定*適合的濃度。
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